Учурда сиздин браузериңизде Javascript өчүрүлгөн. Бул веб-сайттын айрым функциялары Javascript өчүрүлгөндө иштебейт.
Өзүңүздүн жеке маалыматыңыз жана кызыккан дары-дармегиңиз менен катталыңыз, биз сиз берген маалыматты биздин кеңири маалымат базабыздагы макалалар менен дал келтирип, PDF көчүрмөсүн сизге дароо электрондук почта аркылуу жөнөтөбүз.
Ban-Lan-Gen гранулдары чычкандардагы декстран натрий сульфатынан улам пайда болгон өнөкөт кайталануучу колитти ичеги микробиотасын модуляциялоо жана ичегидеги SCFA Derived-GLP-1 өндүрүшүн калыбына келтирүү менен басаңдатат.
Цзяо Пэн,1-3,*Ли Си,4,*Чжэн Лин,3,5 Дуан Лифан,1 Гао Чжэнсян,2,5 Диэху,1 Ли Цзе,6 Ли Сяофэн,6 Шен Сянчун,5 Сяо Хайтао21Пекин университетинин Шэньчжэнь ооруканасынын фармация бөлүмү, Шэньчжэнь, Кытай Эл Республикасы; 2Шэньчжэнь университетинин саламаттыкты сактоо илимдеринин борборунун фармация мектеби, Шэньчжэнь, Кытай Эл Республикасы; 3Гуйчжоу медициналык университетинин этникалык медицина жана салттуу кытай медицинасын иштеп чыгуу жана колдонуу боюнча инженердик технологияларды изилдөө борбору Билим берүү министрлиги, Гуйчжоу провинциясынын фармация боюнча негизги лабораториясы, Гуйчжоу медициналык университети, Гуйян, Кытай Эл Республикасы; 4Гастроэнтерология бөлүмү, Пекин университетинин Шэньчжэнь ооруканасы, Шэньчжэнь, Кытай Эл Республикасы; 5Гуйчжоу медициналык университетинин фармация мектеби, Дары өсүмдүктөрүнүн функциясы жана колдонулушу боюнча мамлекеттик негизги лаборатория, Гуйян; 6 Лабораториялык медицина бөлүмү, Пекин университетинин Шэньчжэнь ооруканасы, Шэньчжэнь, Кытай [email protected] Шен Сянчун, Фармация мектеби, Гуйчжоу медициналык университети, Гуйчжоу, Кытай Эл Республикасы, 550004, Электрондук почта [email protected] Максаты: GLP-1 негизиндеги терапия - бул сезгенүү ичеги ооруларын дарылоонун жаңы ыкмасы. Ban-Lan-Gen (BLG) гранулдары - ар кандай сезгенүү ооруларын дарылоодо потенциалдуу сезгенүүгө каршы активдүүлүктү көрсөткөн белгилүү вируска каршы TCM формуласы. Бирок, анын колитке сезгенүүгө каршы таасири жана анын таасир этүү механизми азырынча белгисиз. МЕТОДДОР: Чычкандарда декстран натрий сульфаты (DSS) тарабынан козголгон өнөкөт кайталануучу колитти аныктоо. BLGнин коргоочу таасирин баалоо үчүн оорунун активдүүлүгүнүн индекстери, жаракаттын гистологиялык маркерлери жана сезгенүүгө каршы цитокиндердин деңгээли жүргүзүлдү. BLGнин ичеги микробиотасы жана ичегиге тийгизген таасири сывороткадагы GLP-1 деңгээли жана жоон ичегидеги Gcg, GPR41 жана GRP43 экспрессиясы, ичеги микробиотасы, заңдагы SCFA деңгээли жана баштапкы чычкандан GLP-1дин бөлүнүп чыгышы менен мүнөздөлдү. Жоон ичеги эпителий клеткалары SCFAдан алынган GLP-1 өндүрүшүн камсыз кылат. Натыйжалар: BLG менен дарылоо жоон ичеги тканындагы дене салмагынын жоголушун, DAIди, жоон ичеги кыскарышын, жоон ичеги ткандарынын жабыркашын жана TNF-α, IL-1β жана IL-6нын сезгенүүгө каршы цитокиндеринин деңгээлин бир кыйла төмөндөттү. Мындан тышкары, BLG менен дарылоо колит чычкандарында жоон ичегидеги Gcg, GPR41 жана GRP43 экспрессиясын жана сывороткадагы GLP-1 деңгээлин бир кыйла калыбына келтире алат, ошондой эле Akkermansia жана Prevotellaceae_UCG-001 сыяктуу SCFA өндүрүүчү бактерияларды көбөйтүү жана Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas жана Oscillibacter сыяктуу бактериялардын санын азайтуу аркылуу. Мындан тышкары, BLG менен дарылоо колит чычкандарынын заңындагы SCFA деңгээлин бир кыйла жогорулата алат. Ошол эле учурда, in vitro эксперименттер BLG менен дарыланган чычкандардын заң экстракты GLP-1ди бөлүп чыгарган баштапкы кичинекей чычкан жоон ичеги эпителий клеткаларын бир топ стимулдай аларын көрсөттү. Тыянактар: Бул ачылыштар BLG колитке каршы таасирге ээ экенин көрсөтүп турат. BLG терапия катары иштелип чыгуу мүмкүнчүлүгүнө ээ, жок дегенде жарым-жартылай ичеги микробиотасын модуляциялоо жана ичегидеги SCFAдан алынган GLP-1 өндүрүшүн калыбына келтирүү аркылуу. Өнөкөт кайталануучу колит үчүн келечектүү дары-дармектер. Ачкыч сөздөр: колит, Ban-Lan-Gen гранулдары, ичеги микробиота, кыска чынжырлуу май кислоталары, GLP-1.
Жаралуу колит (ЖК) – бул жоон ичеги жана көтөн чучуктун узак мөөнөттүү сезгенүү оорусу, ал кайталануучу ич өткөк, ичтин оорушу, арыктоо жана былжырлуу кандуу заң менен мүнөздөлөт.1 Акыркы убакта ЖКнын таралышы мурда аз кездешкен өлкөлөрдө, анын ичинде Кытайда, батыш жашоо образынын популярдуулугу жогорулап баратканы менен көбөйүүдө.2 Бул көбөйүү коомдук саламаттыкты сактоо үчүн чоң көйгөйлөрдү жаратат жана бейтаптардын иштөө жөндөмүнө жана жашоо сапатына олуттуу таасирин тийгизет. Белгилей кетчү нерсе, ЖКнын патогенези көбүнчө белгисиз бойдон калууда, бирок генетика, айлана-чөйрөнүн факторлору, ичеги микробиотасы жана иммундук система ЖКнын өнүгүшүнө салым кошот деп жалпы кабыл алынган.3 Азыр дагы ЖКны айыктырууга мүмкүн эмес жана дарылоонун максаты клиникалык жактан клиникалык симптомдорду көзөмөлдөө, ремиссияны пайда кылуу жана сактоо, былжыр челдин айыгышын стимулдаштыруу жана кайталанышын азайтуу болуп саналат. Классикалык дарылоо ыкмаларына аминосалицилаттар, кортикостероиддер, иммуносупрессанттар жана биологиялык препараттар кирет. Бирок, бул дары-дармектер ар кандай терс таасирлеринен улам каалаган натыйжага жете албайт.4 Жакында көптөгөн клиникалык изилдөөлөр салттуу кытай медицинасы (ТКМ) чоң потенциалга ээ экенин көрсөттү. уулуулугу төмөн болгон колиттик артритти басаңдатууга жардам берип, жаңы TCM терапиясын иштеп чыгуу колиттик артритти дарылоонун келечектүү стратегиясы экенин көрсөтүп турат.
Banlangen Granules (BLG) - бул Banlangen тамырынын суу экстрактысынан жасалган салттуу кытай медицинасынын препараты.8 Вируска каршы эффективдүүлүгүнөн тышкары, BLG ар кандай сезгенүү ооруларын дарылоодо потенциалдуу сезгенүүгө каршы активдүүлүктү көрсөтөт.9,10 Мындан тышкары, глюкозинолаттар (R, S-гоитрин, прогоитрин, эпипрорубин жана глюкозид) жана нуклеозиддер (гипоксантин, аденозин, уридин жана гуанозин) жана индиго жана индиго алкалоиддери, мисалы, индиго жана индиго бөлүнүп алынган жана аныкталган.11,12 Мурунку изилдөөлөр аденозин, уридин жана индирубин кошулмалары колиттин ар кандай жаныбарлардын моделдеринде колитке каршы күчтүү таасир көрсөтөрүн жакшы документтештирген.13-17 Бирок, колиттеги BLGнин эффективдүүлүгүн баалоо үчүн далилдерге негизделген изилдөөлөр жүргүзүлгөн эмес. Учурдагы изилдөөдө биз C57BL/6 чычкандарында декстран натрий сульфаты (DSS) тарабынан козголгон өнөкөт кайталануучу колитке BLGнин коргоочу таасирин изилдеп, ... BLG оозеки кабыл алуу чычкандарда DSS тарабынан индукцияланган өнөкөт кайталануучу жоон ичеги сезгенүүсүн бир топ басаңдаткандыгын, анын жөнгө салуу механизмдери ичеги микробиотасын модуляциялоо жана ичегиден алынган глюкагон сымал пептид-1 (GLP-1) өндүрүшүн калыбына келтирүү менен байланыштуу экендигин изилдөө жүргүзгөн.
BLG гранулдары (кантсыз, NMPA тарабынан бекитилген Z11020357; Beijing Tongrentang Technology Development Co., Ltd., Пекин, Кытай; партиянын номери: 20110966) дарыканалардан сатылып алынган. DSS (Молекулярдык салмагы: 36,000–50,000 Далтон) MP Biologicals (Санта-Ана, АКШ) компаниясынан сатылып алынган. Сульфасалазин (SASP) (≥ 98% тазалык), гематоксилин жана эозин Sigma-Aldrich (Сент-Луис, Миссури, АКШ) компаниясынан сатылып алынган. Чычкандын TNF-α, IL-1β жана IL-6 luminex Elisa анализ комплекттери R&D системаларынан (Миннеаполис, Миннесота, АКШ) сатылып алынган. Уксус кислотасы, пропион кислотасы жана май кислотасы Aladdin Industries (Шанхай, Кытай) компаниясынан сатылып алынган. 2-этилмай кислотасы Merck KGaA (Дармштадт, Германия) компаниясынан сатылып алынган.
6-8 жумалык эркек C57BL/6 чычкандары (дене салмагы 18-22 г) Beijing Wetahe Laboratory Animal Technology Co., Ltd. (Пекин, Кытай) компаниясынан сатылып алынып, 12 саат жарык/караңгы цикл менен 22 ± 2 °C чөйрөдө кармалган. Чычкандар жаңы чөйрөгө көнүү үчүн бир жума бою ичүүчү сууга эркин жетүү мүмкүнчүлүгү менен кемирүүчүлөрдүн стандарттуу диетасы менен азыктанышкан. Андан кийин чычкандар кокустук түрдө төрт топко бөлүнгөн: контролдук топ, DSS моделдик тобу, SASP менен дарыланган топ (200 мг/кг, оозеки) жана BLG менен дарыланган топ (1 г/кг, оозеки). 1А-сүрөттө көрсөтүлгөндөй, мурунку изилдөөбүзгө ылайык, мурунку изилдөөбүзгө ылайык, эксперименталдык өнөкөт кайталануучу колит чычкандарда 5 күн бою 1,8% DSS үч цикли менен, андан кийин 7 күн бою дистилденген суу менен индукцияланган. SASP жана BLG менен дарыланган топтордогу 18 чычкан 0-күндөн баштап күн сайын тиешелүүлүгүнө жараша SASP жана BLG менен дарыланган. Алдын ала эксперименттерге ылайык, BLG дозасы 1 г/кг деп белгиленген. Ошол эле учурда, адабияттарга ылайык, SASP дозасы 200 мг/кг деп белгиленген.4 Контролдук жана DSS моделдик топтору эксперимент учурунда бирдей көлөмдөгү сууну алышкан.
1-сүрөт. BLG чычкандардагы DSS тарабынан козголгон өнөкөт кайталануучу колитти жакшыртат.(A) Өнөкөт кайталануучу колиттин эксперименталдык дизайны жана дарылоо, (B) дене салмагынын өзгөрүшү, (C) оорунун активдүүлүгүнүн индексинин (DAI) баллы, (D) жоон ичегисинин узундугу, (E) жоон ичегисинин репрезентативдик сүрөтү, (F) Жоон ичегиге H&E боёо (чоңойтуу, ×100) жана (G) гистологиялык балл. Маалыматтар орточо ± SEM (n = 6) катары берилген.##p < 0.01 же ###p < 0.001 контролдук (Con) топко салыштырмалуу; *p < 0.05 же **p < 0.01 же ***p < 0.001 DSS тобуна салыштырмалуу.
Дене салмагы, заңдын консистенциясы жана көтөн чучуктан кан агуу күн сайын катталып турган. Оорунун активдүүлүгүнүн индекси (ОАК) мурда сүрөттөлгөндөй дене салмагынын, заңдын консистенциясынын жана көтөн чучуктан кан агуунун упайларын бириктирүү менен аныкталган.19 Эксперименттин аягында бардык чычкандар эвтаназияланып, андан аркы эксперименттер үчүн кан, заң жана жоон ичеги чогултулган.
Жоон ичеги тканы формалин менен бекитилип, парафинге салынган. 5 микрондук кесимдер жасалып, гематоксилин-эозин (H&E) менен боёлгон, андан кийин мурда сүрөттөлгөндөй сокурланып, балл коюлган.19
Жоон ичегинин тканынын жалпы РНКсы Тризол реагенти (Invitrogen, Карлсбад, Калифорния) менен бөлүнүп алынган, андан кийин тескери транскриптаза менен кДНК бөлүнүп алынган (TaKaRa, Kusatsu, Shiga, Япония). Сандык ПЦР SYBR Green Master (Roche, Базель, Швейцария) менен реалдуу убакыттагы ПЦР системасы аркылуу жүргүзүлдү. Максаттуу ген транскрипттери β-актинге чейин нормалдаштырылып, маалыматтар 2-ΔΔCT ыкмасы менен талданган. Ген праймерлеринин ырааттуулугу 1-таблицада көрсөтүлгөн.
Чычкандын жоон ичеги эпителий клеткаларын бөлүп алуу жана өстүрүү мурда сүрөттөлгөндөй жүргүзүлдү.20 Кыскача айтканда, 6-8 жумалык чычкандардын жоон ичегилери алгач моюнчасынын чыгышы менен союлгандан кийин кесилип, андан кийин узунунан ачылып, Hanks Balanced Salt эритмеси (кальций жана магнийсиз HBSS) менен иштетилип, 0,5-1 мм майда бөлүктөргө кесилген. Андан кийин ткандар эркин DMEM чөйрөсүндө 0,4 мг/мл коллагеназа XI (Sigma, Пул, Улуу Британия) менен сиңирилип, бөлмө температурасында 300 xg ылдамдыкта 5 мүнөт центрифугаланган. Гранулду DMEM чөйрөсүндө (10% түйүлдүк уйдун сывороткасы, 100 бирдик/мл пенициллин жана 100 мкг/мл стрептомицин менен толукталган) 37 °C температурада кайра эритип, нейлон тордон өткөрүлгөн (тешикчелердин өлчөмү ~250 мкм). Жоон ичеги эпителий клеткаларынын аликвоталары айнек түбүндөгү идиштерге салынып, уксус кислотасы, пропион кислотасы, май кислотасы жана чычкандын заңы менен инкубацияланган. экстракттарды 37°C температурада 2 саат, 5% CO2.
Жоон ичеги тканы PBS менен гомогендештирилген жана жоон ичеги тканындагы IL-6, TNF-α жана IL-1β цитокиндеринин деңгээли luminex ELISA анализ комплекттерин (R&D системалары, Миннеаполис, Миннесота, АКШ) колдонуу менен аныкталган. Ошо сыяктуу эле, чычкандардын баштапкы жоон ичеги эпителий клеткаларынын кан сары суусундагы жана өстүрүүчү чөйрөдөгү GLP-1 деңгээли өндүрүүчүнүн көрсөтмөлөрүнө ылайык ELISA комплекти (Bioswamp, Ухань, Кытай) менен аныкталган.
Куурдан алынган жалпы ДНК ДНК экстракциялык комплектти (Tiangen, Кытай) колдонуу менен алынган. ДНКнын сапаты жана саны тиешелүүлүгүнө жараша 260 нм/280 нм жана 260 нм/230 нм катышында өлчөнгөн. Андан кийин, ар бир экстракцияланган ДНКны шаблон катары колдонуп, ар кандай аймактардагы 16S рРНК генинин V3-V4 аймактарын күчөтүү үчүн 338F (ACTCCTACGGGAGGCAGCAG) жана 806R (GGACTACHVGGGTWTCTAAT) атайын праймерлер колдонулган. ПТР продуктулары QIAquick Gel Extraction Kit (QIAGEN, Германия) аркылуу тазаланган, реалдуу убакыттагы ПТР менен сандык жактан аныкталган жана IlluminaMiseq PE300 секвенирлөө платформасын (Illumina Inc., CA, АКШ) колдонуу менен секвенирленген. Биоинформатикалык анализ үчүн мурда билдирилген протоколдорго ылайык маалыматтарды иштетүү жүргүзүлгөн.21,22 Кыскасы, чийки экспресс файлдарын чыпкалоо үчүн Cutadapt (V1.9.1) колдонуңуз. OTUлар... UPARSE (7.0.1001 версиясы) аркылуу кластерленген, окшоштук чеги 97% болгон жана химердик ырааттуулуктарды алып салуу үчүн UCHIME колдонулган. Жамааттын курамын талдоо жана классификациялоо SILVA рибосомалык РНК генинин маалымат базасына негизделген RDP классификаторун (http://rdp.cme.msu.edu/) колдонуу менен жүргүзүлдү.
Кыска чынжырлуу май кислоталарынын (уксус кислотасы, пропион кислотасы жана май кислотасы) деңгээли мурда Тао ж.б. тарабынан сүрөттөлгөндөй, бир аз өзгөртүүлөр менен өлчөнгөн.23 Кыскача айтканда, 100 мг заң алгач 0,4 мл деиондоштурулган сууга эритилип, андан кийин 0,1 мл 50% күкүрт кислотасы жана 0,5 мл 2-этилмай кислотасы (ички стандарт) кошулуп, андан кийин гомогендештирилип, 4°C температурада ысытылган. C температурада 15 мүнөт бою 12 000 айн/мин ылдамдыкта центрифугаланган. Үстүнкү катмар 0,5 мл эфир менен экстракцияланып, анализ үчүн GCге сайылган. Газ хроматографиясын (GC) анализдөө үчүн үлгүлөр жалын иондоштуруу детектору (FID) менен жабдылган GC-2010 Plus газ хроматографын (Shimadzu, Inc.) колдонуп анализделген. Бөлүү ZKAT-624 колонкасы, 30 м × 0,53 мм × 0,3 мкм (Lanzhou Zhongke Antai Analytical Technology Co., Ltd., Кытай) колдонуу менен жүргүзүлгөн. Маалыматтар GC чечим программасын (Shimadzu, Inc.) колдонуу менен алынган. Бөлүү катышы 10:1, алып жүрүүчү газ азот жана агым ылдамдыгы 6 мл/мин болгон. Инъекция көлөмү 1 мкл болгон. Инжектордун жана детектордун температурасы 300°C болгон. Духовканын температурасы 140°C температурада 13,5 мүнөт кармалып, андан кийин 250°C чейин көтөрүлгөн. мүнөтүнө 120°C ылдамдыкта, температура 5 мүнөт бою кармалып турду.
Маалыматтар орточо маани ± орточо маанинин стандарттык катасы (SEM) катары берилген. Маалыматтардын маанилүүлүгү бир тараптуу ANOVA, андан кийин Дункандын көп диапазондуу тести менен бааланган. Бардык эсептөөлөр үчүн GraphPad Prism 5.0 программасы (GraphPad Software Inc., Сан-Диего, Калифорния, АКШ) колдонулган жана p < 0.05 статистикалык жактан маанилүү деп эсептелген.
Колиттин колит оорусу катуу ичтин оорусу, ич өткөк жана кан агуу менен коштолгон өнөкөт кайталануучу колит экени белгилүү. Ошондуктан, чычкандарда DSS тарабынан козголгон өнөкөт кайталануучу колит BLGнин колитке каршы эффективдүүлүгүн баалоо үчүн аныкталган (1A-сүрөт). Контролдук топ менен салыштырганда, DSS моделдик тобундагы чычкандардын дене салмагы бир топ азайып, DAI жогору болгон жана бул өзгөрүүлөр BLG менен дарылоодон 24 күн өткөндөн кийин бир топ артка кеткен (1B жана C-сүрөттөр). Жоон ичеги кыскарышы Колиттин маанилүү белгиси болуп саналат. 1D жана E-сүрөттөрдө көрсөтүлгөндөй, DSS алган чычкандардын жоон ичеги узундугу бир топ кыскарган, бирок BLG менен дарылоо жеңилдеген. Кийинчерээк жоон ичеги сезгенүүсүн баалоо үчүн гистопатологиялык анализ жүргүзүлгөн. H&E боёлгон сүрөттөрү жана патологиялык упайлары DSSти колдонуу жоон ичеги архитектурасын бир топ бузуп, крипталардын бузулушуна алып келгенин, ал эми BLG менен дарылоо крипталардын бузулушун жана патологиялык упайларды бир топ төмөндөткөнүн көрсөттү (1F жана G-сүрөттөр). Белгилей кетчү нерсе, BLGнин 1 г/кг дозасындагы коргоочу таасири SASPтин дозасындагы таасирине окшош болгон 200 мг/кг. Жалпысынан алганда, бул жыйынтыктар BLG чычкандарда DSS тарабынан козголгон өнөкөт кайталануучу колиттин оордугун азайтууда натыйжалуу экенин көрсөтүп турат.
TNF-α, IL-1β жана IL-6 жоон ичеги сезгенүүсүнүн маанилүү сезгенүү маркерлери болуп саналат. 2А-сүрөттө көрсөтүлгөндөй, DSS контролдук топко салыштырмалуу жоон ичегиде TNF-α, IL-1β жана IL-6 генинин экспрессиясынын олуттуу жогорулашына алып келген. BLGди колдонуу бул DSS аркылуу болгон өзгөрүүлөрдү бир топ артка кайтара алат. Андан кийин, биз жоон ичеги тканындагы сезгенүү цитокиндери TNF-α, IL-1β жана IL-6 деңгээлин аныктоо үчүн ELISAны колдондук. Жыйынтыктар ошондой эле DSS менен дарыланган чычкандарда жоон ичегидеги TNF-α, IL-1β жана IL-6 деңгээли бир топ жогорулаганын, ал эми BLG менен дарылоо бул көбөйүүнү басаңдатканын көрсөттү (2B-сүрөт).
2-сүрөт. BLG DSS менен дарыланган чычкандардын жоон ичегисинде ген экспрессиясын жана сезгенүүнү пайда кылуучу цитокиндер TNF-α, IL-1β жана IL-6 өндүрүшүн басат.(A) TNF-α, IL-1β жана IL-6 жоон ичеги генинин экспрессиясы; (B) TNF-α, IL-1β жана IL-6 жоон ичеги белокторунун деңгээли. Маалыматтар орточо ± SEM (n = 4–6) катары берилген.#p < 0.05 же ##p < 0.01 же ###p < 0.001 контролдук (Con) топко салыштырмалуу; *p < 0.05 же **p < 0.01 DSS тобуна салыштырмалуу.
Ичеги дисбактериозу UC патогенезинде абдан маанилүү.24 DSS менен дарыланган чычкандардын ичеги микробиотасын BLG модуляциялайбы же жокпу, изилдөө үчүн, ичеги курамынын бактериялык коомчулугун талдоо үчүн 16S рРНК секвенирлөө жүргүзүлдү. Венн диаграммасы үч топтун 385 OTU бөлүшөөрүн көрсөтүп турат. Ошол эле учурда, ар бир топтун уникалдуу OTUлары болгон (3A-сүрөт). Андан тышкары, 3B жана C сүрөттөрүндө көрсөтүлгөн Chao1 индекси жана Шеннон индекси BLG менен дарыланган чычкандарда ичеги микробиотасынын коомчулугунун ар түрдүүлүгү азайганын, анткени BLG менен дарыланган топто Шеннон индекси бир кыйла төмөндөгөнүн көрсөттү. Үч топтун ортосундагы кластердик үлгүлөрдү аныктоо үчүн негизги компоненттик анализ (PCA) жана негизги координаттык анализ (PCoA) колдонулган жана DSS менен дарыланган чычкандардын коомчулугунун түзүлүшү BLG менен дарылоодон кийин так бөлүнгөнүн көрсөттү (3D жана E-сүрөттөр). Бул маалыматтар BLG менен дарылоо DSS менен индукцияланган колит менен ооруган чычкандардын коомчулугунун түзүлүшүнө олуттуу таасир эткенин көрсөтүп турат.
3-сүрөт. BLG DSS менен шартталган колит менен ооруган чычкандардын ичеги микробиоталарынын ар түрдүүлүгүн өзгөртөт.(A) OTUнун Венн диаграммасы, (B) Chao1 индекси, (C) Шеннондун байытуу индекси, (D) OTUнун негизги компоненттик анализинин (PCA) упайынын графиги, (E) OTUнун негизги координаттык анализинин (PCoA) упайынын графиги. Сүрөт. Маалыматтар орточо ± SEM (n = 6) катары берилген.**p < 0.01 DSS тобуна салыштырмалуу.
Фекалдык микробиотанын белгилүү бир өзгөрүүлөрүн баалоо үчүн, биз ичеги микробиотанын курамын бардык таксономиялык деңгээлдерде талдап чыктык. 4А-сүрөттө көрсөтүлгөндөй, бардык топтордогу негизги филалар Firmicutes жана Bacteroidetes, андан кийин Verrucomicrobia болгон. DSS менен дарыланган чычкандардын фекалдык микробдук коомчулуктарында Firmicutes жана Firmicutes/Bacteroidetes катыштарынын салыштырмалуу саны контролдук чычкандарга салыштырмалуу бир топ жогорулаган жана бул өзгөрүүлөр BLG менен дарылоодон кийин бир топ тескери кеткен. Атап айтканда, BLG менен дарылоо DSS менен индукцияланган колит менен ооруган чычкандардын заңындагы Verrucobacteriumдун салыштырмалуу санын бир топ жогорулаткан. Үй чарбасынын деңгээлинде фекалдык микробдук коомчулуктарды Lachnospiriaceae, Muribaculaceae, Akkermansiaceae, Ruminococcaceae жана Prevotellaceae ээлеген (4B-сүрөт). DSS тобу менен салыштырганда, BLGнин азайышы Akkermansiaceae санын көбөйткөн, бирок Lachnospiraceae жана Ruminococcaceae санын азайткан. Белгилей кетчү нерсе, тукум деңгээлинде Фекалдык микробиотаны Lachnospira_NK4A136_group, Akkermansia жана Prevotellaceae_UCG-001 ээлеген (4C-сүрөт). Бул ачылыш ошондой эле BLG дарылоосу DSS чакырыгына жооп катары микробиотанын дисбалансын натыйжалуу калыбына келтиргенин көрсөттү, ал Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas жана Oscillibacterдин азайышы жана Akkermansia жана Prevotellaceae_UCG-001дин көбөйүшү менен мүнөздөлөт.
4-сүрөт. BLG DSS менен шартталган колит чычкандарында ичеги микробиотанын көптүгүн өзгөртөт.(A) Филиум деңгээлинде ичеги микробиотанын көптүгү; (B) Үй-бүлө деңгээлинде ичеги микробиотанын көптүгү; (C) Тукум деңгээлинде ичеги микробиотанын көптүгү. Маалыматтар орточо ± SEM (n = 6) катары берилген.#p < 0.05 же ###p < 0.001 контролдук (Con) топко салыштырмалуу; *p < 0.05 же **p < 0.01 же ***p < 0.001 DSS тобуна салыштырмалуу.
Кыска чынжырлуу май кислоталары (SCFA) Akkermansia жана Prevotellaceae_UCG-001дин негизги метаболиттери экенин, ал эми ацетат, пропионат жана бутират ичегинин көңдөйүндө эң көп кездешкен SCFAлар экенин эске алганда, биз дагы эле изилдөөбүздүн үстүндөбүз. 5-сүрөттө көрсөтүлгөндөй, DSS менен дарыланган топто заңдагы ацетаттын, пропионаттын жана бутираттын концентрациясы бир кыйла төмөндөгөн, ал эми BLG менен дарылоо бул төмөндөөнү негизинен басаңдата алган.
5-сүрөт. BLG DSS менен индукцияланган колит менен ооруган чычкандардын заңындагы SCFA деңгээлин жогорулатат.(A) Заңдагы уксус кислотасынын курамы; (B) заңдагы пропион кислотасынын курамы; (C) заңдагы май кислотасынын курамы. Маалыматтар орточо ± SEM (n = 6) катары берилген.#p < 0.05 же ##p < 0.01 контролдук (Con) топко салыштырмалуу; *p < 0.05 же **p < 0.01 DSS тобуна салыштырмалуу.
Биз андан ары тукум деңгээлиндеги дифференциалдык SCFA жана фекалдык микробиотанын ортосундагы Пирсон корреляция коэффициентин эсептедик. 6-сүрөттө көрсөтүлгөндөй, Akkermansia пропион кислотасынын (Pearson = 0.4866) жана май кислотасынын (Pearson = 0.6192) өндүрүшү менен оң корреляцияланган. Ал эми Enteromonas жана Oscillobacter экөө тең ацетат өндүрүшү менен терс байланышта болуп, Пирсон коэффициенттери тиешелүүлүгүнө жараша 0.4709 жана 0.5104 түзгөн. Ошо сыяктуу эле, Ruminococcaceae_UCG-014 тиешелүүлүгүнө жараша пропион кислотасынын (Pearson = 0.4508) жана май кислотасынын (Pearson = 0.5842) өндүрүшү менен терс корреляцияланган.
6-сүрөт. Дифференциалдык SCFAлар менен жоон ичеги микробдорунун ортосундагы Пирсон корреляциялык анализи.(A) Уксус кислотасы кошулган энтеромоналар; (B) Уксус кислотасы кошулган мээ чайкалуучу таякчалар; (C) Аккермансия пропион кислотасына каршы; (D) Пропион кислотасы кошулган Ruminococcus_UCG-014; (E) Май кислотасы кошулган Akkermansiya; (F)) Май кислотасы кошулган Ruminococcus _UCG-014.
Глюкагон сыяктуу пептид-1 (GLP-1) - бул сезгенүүгө каршы касиетке ээ болгон проглюкагондун (Gcg) клетка түрүнө мүнөздүү пост-трансляциялык продуктусу.28 7-сүрөттө көрсөтүлгөндөй, DSS Gcg мРНК экспрессиясынын олуттуу төмөндөшүнө алып келген. Жоон ичеги жана BLG менен дарылоо контролдук топко салыштырмалуу DSS тарабынан индукцияланган Gcg азайышын олуттуу түрдө кайтара алган (7A-сүрөт). Ошол эле учурда, DSS менен дарыланган топто кан сары суусундагы GLP-1 деңгээли бир кыйла төмөндөгөн жана BLG менен дарылоо бул азайуунун алдын ала алган (7B-сүрөт). Кыска чынжырлуу май кислоталары G-протеин менен байланышкан рецептор 43 (GRP43) жана G-протеин менен байланышкан рецептор 41 (GRP41) активдешүүсү аркылуу GLP-1 секрециясын стимулдай алгандыктан, биз колит чычкандарынын жоон ичегисиндеги GPR41 жана GRP43тү да изилдеп, DSS менен күрөшүүдөн кийин GRP43 жана GPR41 жоон ичеги мРНК экспрессиясы бир кыйла төмөндөгөнүн жана BLG менен дарылоо бул азайууларды натыйжалуу калыбына келтире аларын аныктадык (7A-сүрөт). 7C жана D).
7-сүрөт. BLG DSS менен дарыланган чычкандарда кан сары суусундагы GLP-1 деңгээлин жана жоон ичегидеги Gcg, GPR41 жана GRP43 мРНК экспрессиясын жогорулатат.(A) Жоон ичеги тканындагы Gcg мРНК экспрессиясы; (B) Кан сары суусундагы GLP-1 деңгээли; (C) Жоон ичеги тканындагы GPR41 мРНК экспрессиясы; (D) Жоон ичеги тканындагы GPR43 мРНК экспрессиясы. Маалыматтар орточо ± SEM (n = 5–6) катары берилген.#p < 0.05 же ##p < 0.01 контролдук (Con) топко салыштырмалуу; *p < 0.05 DSS тобуна салыштырмалуу.
BLG менен дарылоо DSS менен дарыланган чычкандардын кан сары суусундагы GLP-1 деңгээлин, жоон ичегидеги Gcg мРНК экспрессиясын жана фекалдык SCFA деңгээлин жогорулата алгандыктан, биз ацетат, пропионат жана бутиратты, ошондой эле контролдук (F-Con), DSS колити (F-Con) -DSS) жана BLG менен дарыланган колит (F-BLG) чычкандарынын чычкандардын биринчилик жоон ичеги эпителий клеткаларынан GLP-1дин бөлүнүп чыгышын андан ары изилдедик. 8A-сүрөттө көрсөтүлгөндөй, тиешелүүлүгүнө жараша 2 мМ уксус кислотасы, пропион кислотасы жана май кислотасы менен дарыланган биринчилик чычкандын жоон ичеги эпителий клеткалары мурунку изилдөөлөргө ылайык, GLP-1дин бөлүнүп чыгышын олуттуу түрдө стимулдашты.29,30 Ошо сыяктуу эле, бардык F-Con, F-DSS жана F-BLG (0,25 г заңга барабар) чычкандардын биринчилик жоон ичеги эпителий клеткаларынан GLP-1дин бөлүнүп чыгышын бир топ стимулдашты. Белгилей кетчү нерсе, F-DSS менен дарыланган биринчилик чычкандын жоон ичеги эпителий клеткалары тарабынан бөлүнүп чыккан GLP-1дин көлөмү F-Con жана F-BLG менен дарыланган биринчилик чычкандарга караганда бир топ төмөн болгон. жоон ичеги эпителий клеткалары. (8B-сүрөт). Бул маалыматтар BLG менен дарылоо ичегидеги SCFAдан алынган GLP-1 өндүрүшүн бир кыйла калыбына келтиргенин көрсөтүп турат.
8-сүрөт. BLGден алынган SCFA чычкандын жоон ичеги эпителий клеткаларынан GLP-1дин бөлүнүп чыгышын стимулдайт.(A) Уксус кислотасы, пропион кислотасы жана май кислотасы чычкандын жоон ичеги эпителий клеткаларынан GLP-1дин бөлүнүп чыгышын стимулдайт; (B) фекалдык экстракттар F-Con, F-DSS жана F-BLG чычкандын жоон ичеги эпителий клеткаларын стимулдайт. Бөлүнүп чыккан GLP-1дин көлөмү. Жоон ичеги эпителий клеткаларынын аликвоталары айнек түбүндөгү Петри идиштерине салынып, тиешелүүлүгүнө жараша 2 мМ уксус кислотасы, пропион кислотасы, май кислотасы жана фекалдык экстракттар F-Con, F-DSS жана F-BLG (0,25 г заңга барабар) менен иштетилген. 37°C температурада 2 саат, тиешелүүлүгүнө жараша 5% CO2. Чычкандын жоон ичеги эпителий клеткаларынан бөлүнүп чыккан GLP-1дин көлөмү ELISA аркылуу аныкталган. Маалыматтар орточо ± SEM (n = 3) катары көрсөтүлгөн. #p < 0.05 же ##p < 0.01 бланк же F-Con менен салыштырганда; *p < 0.05 F-DSS менен салыштырганда.
Кыскартуулар: Ace, уксус кислотасы; Pro, пропион кислотасы; бирок, май кислотасы; F-Con, контролдук чычкандардын заң экстракты; F-DSS, колит чычкандарынын заң экстракты; F-BLG, BLG менен дарыланган жоон ичегиден алынган. Сезгенүү чычкандарынын заң экстракты.
Дүйнөлүк саламаттыкты сактоо уюму тарабынан рефрактердик оору катары тизмеленген UC глобалдык коркунучка айланууда; Бирок, ооруну алдын алуу жана дарылоонун натыйжалуу ыкмалары дагы эле чектелүү. Ошондуктан, колит үчүн жаңы коопсуз жана натыйжалуу терапиялык стратегияларды изилдөө жана иштеп чыгуу зарыл. Салттуу кытай медицинасынын препараттары келечектүү вариант болуп саналат, анткени кылымдар бою кытай калкынын колит дарылоосунда көптөгөн салттуу кытай медицинасынын препараттары натыйжалуу экени далилденген жана алардын баары адамдар жана жаныбарлар үчүн зыянсыз биологиялык органикалык жана табигый материалдар.31,32 Бул изилдөө колит дарылоо үчүн коопсуз жана натыйжалуу салттуу кытай медицинасынын препаратын издөөгө жана анын таасир этүү механизмин изилдөөгө багытталган.BLG - сасык тумоо менен дарылоодо колдонулган белгилүү кытай чөптөрүнүн формуласы.8,33 Биздин лабораторияда жана башкаларда жүргүзүлгөн иштер BLG менен бир эле чийки заттан иштетилген салттуу кытай медицинасынын продуктусу болгон индиго адамдарда жана жаныбарларда колит дарылоодо олуттуу натыйжалуулукту көрсөтөрүн көрсөттү.4,34 Бирок, BLGнин колитке каршы таасири жана анын таасири Механизм белгисиз. Учурдагы изилдөөдө биздин жыйынтыктар BLG ичегинин модуляциясы менен байланышкан DSS тарабынан козголгон жоон ичеги сезгенүүсүн натыйжалуу басаңдатарын көрсөтүп турат. микробиота жана ичегиден алынган GLP-1 өндүрүшүн калыбына келтирүү.
Колиттин кайталануучу мезгилдери салмак жоготуу, ич өткөк, көтөн чучуктан кан кетүү жана жоон ичегинин былжыр челинин кеңири жабыркашы сыяктуу типтүү клиникалык белгилери бар кайталануучу мезгилдер менен мүнөздөлөрү белгилүү.35 Ошентип, өнөкөт кайталануучу колит беш күн бою 1,8% DSS үч цикли берилип, андан кийин жети күн суу ичүү менен берилген. 1B-сүрөттө көрсөтүлгөндөй, өзгөрүп турган салмак жоготуу жана DAI упайлары өнөкөт кайталануучу колиттин ийгиликтүү индукциясын көрсөткөн. BLG менен дарыланган топтогу чычкандар 8-күндөн баштап калыбына келүүнү көрсөтүшкөн, бул 24-күндөн бир топ айырмаланган. DAI упайында да ушул сыяктуу өзгөрүүлөр байкалган, бул колиттин клиникалык жакшырышынын жакшырганын көрсөтүп турат. Жоон ичегинин жаракаты жана сезгенүү абалы жагынан алганда, жоон ичегинин узундугу, жоон ичеги тканынын жабыркашы, ошондой эле жоон ичеги тканындагы TNF-α, IL-1β жана IL-6 просезгенүү цитокиндеринин экспрессиясы жана өндүрүшү да BLG менен дарылоодон кийин бир топ жакшырган. Жалпысынан алганда, бул жыйынтыктар BLG чычкандардагы өнөкөт кайталануучу колитти дарылоодо натыйжалуу экенин ачык көрсөтүп турат.
BLG өзүнүн фармакологиялык таасирин кантип көрсөтөт? Мурунку көптөгөн изилдөөлөр ичеги микробиотасы колиттин патогенезинде негизги ролду ойной турганын көрсөттү жана микробиомго негизделген жана микробиомго багытталган терапиялар колитти дарылоо үчүн абдан жагымдуу стратегия катары пайда болду. Ушул изилдөөдө биз BLG менен дарылоо ичеги микробиотасынын курамында олуттуу өзгөрүүлөргө алып келгенин көрсөттүк, бул BLGнин DSS менен шартталган колитке каршы коргоочу таасири ичеги микробиотасын модуляциялоо менен байланыштуу экенин көрсөтүп турат. Бул байкоо ичеги микробиотасынын гомеостазын кайра программалоо TCM препараттарынын натыйжалуулугун түшүнүүнүн маанилүү ыкмасы деген түшүнүккө дал келет.36,37 Белгилей кетчү нерсе, Akkermansia - бул ичегинин былжыр катмарында жашаган, муциндерди майдалаган, пропион кислотасын өндүргөн, бокал клеткаларынын дифференциациясын стимулдаган жана былжыр челдин тосмо бүтүндүгүнүн функциясын сактаган Грам-терс жана катуу анаэробдук бактерия.26 Көптөгөн клиникалык жана жаныбарлардын маалыматтары Akkermansia дени сак былжыр чел менен тыгыз байланышта экенин көрсөтүп турат,38 жана Akkermansia spp. оозеки кабыл алуу. былжырлуу челдин сезгенүүсүн бир топ жакшырта алат.39 Биздин учурдагы маалыматтар BLG менен дарылоодон кийин Akkermansiaнын салыштырмалуу көптүгү бир топ жогорулаганын көрсөтүп турат. Мындан тышкары, Prevotellaceae_UCG-001 - SCFA өндүрүүчү бактерия.27 Бир нече изилдөөлөр Prevotellaceae_UCG-001 колит менен ооруган жаныбарлардын заңында салыштырмалуу аз көптүктө табылганын көрсөттү.40,41 Биздин учурдагы маалыматтар ошондой эле BLG менен дарылоо DSS менен дарыланган чычкандардын жоон ичегисиндеги Prevotellaceae_UCG-001дин салыштырмалуу көптүгүн бир топ жогорулата аларын көрсөтүп турат. Ал эми Oscillibacter - мезофилдик, так анаэробдук бактерия.42 Oscillibacterдин салыштырмалуу көптүгү UC чычкандарында бир топ жогорулаганын жана IL-6 жана IL-1β деңгээли жана патологиялык упайлар менен олуттуу оң корреляцияланганын билдирди.43,44 Белгилей кетчү нерсе, BLG менен дарылоо DSS менен дарыланган чычкандардын заңындагы Oscillibacterдин салыштырмалуу көптүгүн бир топ төмөндөттү. Белгилей кетчү нерсе, бул BLG менен өзгөртүлгөн бактериялар эң көп SCFA өндүрүүчү бактериялар болгон. Мурунку көптөгөн изилдөөлөр жоон ичеги сезгенүүсүнө жана ичегинин эпителий бүтүндүгүн коргоого SCFAлардын потенциалдуу пайдалуу таасирин көрсөттү.45,46 Биздин учурдагы маалыматтарыбыз ошондой эле BLG менен дарыланган чычкандарда DSS менен дарыланган заңдагы SCFA ацетатынын, пропионаттын жана бутираттын концентрациясы бир топ жогорулаганын байкаган. Жалпысынан алганда, бул ачылыштар BLG менен дарылоо өнөкөт кайталануучу колит менен ооруган чычкандарда DSS менен индукцияланган SCFA өндүргөн бактерияларды натыйжалуу күчөтө аларын ачык көрсөтүп турат.
GLP-1 - бул негизинен ичегинин жана жоон ичегиде өндүрүлгөн инкретин жана ашказандын бошоп калышын кечеңдетүү жана тамактангандан кийинки кан глюкозасын төмөндөтүүдө маанилүү ролду ойнойт.47 Далилдер дипептидил пептидаза (DPP)-4, GLP-1 рецепторунун агонисти жана GLP-1 наномедицинасынын чычкандардагы ичеги сезгенүүсүн натыйжалуу басаңдата аларын көрсөтүп турат.48-51 Мурунку изилдөөлөрдө айтылгандай, SCFAнын жогорку концентрациясы адамдарда жана чычкандарда плазмадагы GLP-1 деңгээли менен байланышкан.52 Биздин учурдагы маалыматтар BLG менен дарылоодон кийин, сары суудагы GLP-1 деңгээли жана Gcg мРНК экспрессиясы бир кыйла жогорулаганын көрсөтүп турат. Ошо сыяктуу эле, DSS менен дарыланган колит чычкандарынын фекалдык экстракттары менен стимулдаштырууга салыштырмалуу, BLG менен дарыланган колит чычкандарынын фекалдык экстракттары менен стимулдаштыруудан кийин жоон ичеги культураларында GLP-1дин бөлүнүп чыгышы бир кыйла жогорулаган. SCFAлар GLP-1дин бөлүнүп чыгышына кандай таасир этет? Гвен Толхерст жана башкалар. SCFA GRP43 жана GPR41 аркылуу GLP-1 секрециясын стимулдай алары кабарланган.29 Биздин учурдагы маалыматтарыбыз ошондой эле BLG менен дарылоо DSS менен дарыланган чычкандардын жоон ичегисинде GRP43 жана GPR41 мРНК экспрессиясын бир кыйла жогорулатарын көрсөтүп турат. Бул маалыматтар BLG менен дарылоо GRP43 жана GPR41ди активдештирүү менен SCFA тарабынан стимулдаштырылган GLP-1 өндүрүшүн калыбына келтире аларын көрсөтүп турат.
BLG Кытайда узак мөөнөттүү рецептсиз берилүүчү (OTC) дары. Куньмин чычкандарында BLGнин максималдуу жол берилген дозасы 80 г/кг түзөт жана курч уулуулугу байкалган эмес.53 Учурда адамдарда BLGнин сунушталган дозасы (кантсыз) күнүнө 9-15 г (күнүнө 3 жолу). Биздин изилдөө көрсөткөндөй, 1 г/кг дозадагы BLG чычкандарда DSS козгогон өнөкөт кайталануучу колитти жакшырткан. Бул доза клиникалык жактан колдонулган BLG дозасына жакын. Биздин изилдөө ошондой эле анын таасир этүү механизми, жок дегенде жарым-жартылай, ичеги микробиотасында өзгөрүүлөр, атап айтканда, Akkermansia жана Prevotellaceae_UCG-001 сыяктуу SCFA өндүрүүчү бактериялар менен ичегиден алынган GLP-1 өндүрүшүн калыбына келтирүү менен байланыштуу экенин аныктады. Бул ачылыштар BLG клиникалык колитти дарылоо үчүн потенциалдуу терапиялык агент катары андан ары карап чыгууга татыктуу экенин көрсөтүп турат. Бирок, анын ичеги микробиотасын модуляциялоосунун так механизми микробиотанын жетишсиздиги бар чычкандар жана фекалдык бактерияларды трансплантациялоо менен тастыкталышы керек.
Ace, уксус кислотасы; бирок, май кислотасы; BLG, пандан; DSS, декстран натрий сульфаты; DAI, оорунун активдүүлүгүнүн индекси; DPP, дипептидил пептидаза; FID, жалын иондоштуруу детектору; F-Con, контролдоо Чычкандардын фекалдык экстракттары; F-DSS, DSS колит чычкандарынын фекалдык экстракттары; F-BLG, BLG менен дарыланган колит чычкандарынын фекалдык экстракттары; GLP-1, глюкагон сымал пептид-1; Gcg, глюкагон; газ хроматографиясы, газ хроматографиясы; GRP43, G протеини менен байланышкан рецептор 43; GRP41, G протеини менен байланышкан рецептор 41; H&E, гематоксилин-эозин; HBSS, Hanks' Balanced Salt Eritme; OTC, OTC; PCA, негизги компоненттик анализ; PCoA, негизги координаттык анализ; Pro, пропион кислотасы; SASP, сульфасалазин; SCFA, кыска чынжырлуу май кислоталары; Кытай медицинасы, салттуу кытай медицинасы; Жаралуу колит, жаралуу колит.
Бардык эксперименталдык протоколдор Пекин университетинин Шэньчжэнь-Гонконг Илим жана технология университетинин медициналык борборунун (Шэньчжэнь, Кытай) Жаныбарлар этикасы боюнча комитети тарабынан Институционалдык көрсөтмөлөргө жана Жаныбарлар жөнүндө эрежелерге (этика номери A2020157) ылайык бекитилген.
Бардык авторлор концепцияга жана дизайнга, маалыматтарды алууга же маалыматтарды талдоо жана чечмелөөгө олуттуу салым кошушкан; макаланын долбоорун түзүүгө же маанилүү интеллектуалдык мазмунду сын көз менен карап чыгууга катышкан; кол жазманы учурдагы журналга тапшырууга макул болушкан; акыры жарыялоо үчүн версиясын бекитишкен; Иштин бардык аспектилери үчүн жооптуу болушкан.
Бул иш Кытайдын Улуттук жаратылыш таануу фонду (81560676 жана 81660479), Шэньчжэнь университетинин биринчи класстагы долбоору (86000000210), Шэньчжэнь илим жана технологиялык инновация комитетинин фонду (JCYJ20210324093810026) жана Гуандун провинциясынын медициналык илим жана технологияны изилдөө фонду (A2020157 жана A2020272), Гуйчжоу медициналык университетинин дарыканасы Гуйчжоу провинциясынын негизги лабораториясы (YWZJ2020-01) жана Пекин университетинин Шэньчжэнь ооруканасы (JCYJ2018009) тарабынан колдоого алынган.
1. Тан Б, Чжу Дж, Чжан Б ж.б. Чычкандардагы декстран натрий сульфаты менен шартталган эксперименталдык колитте триптолиддин сезгенүүгө каршы каражат катары терапиялык потенциалы. pre-immune.2020;11:592084.doi: 10.3389/fimmu.2020.592084
2. Каплан Г.Г. ИБАнын глобалдык жүгү: 2015-жылдан 2025-жылга чейин. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 2015; 12: 720–727. doi: 10.1038/nrgastro. 2015.150
3. Пен Ж., Чжэн Т.Т., Ли Сюэ ж.б. Өсүмдүктөрдөн алынган алкалоиддер: сезгенүү ичеги ооруларындагы келечектүү оору модификаторлору. Префармакология. 2019; 10:351.doi:10.3389/fphar.2019.00351
4. Сяо Хайтен, Пен Цзе, Вэнь Б ж.б. Indigo Naturalis чычкандардагы DSS тарабынан индукцияланган колитте жоон ичегидеги кычкылдануу стрессин жана Th1/Th17 реакцияларын басаңдатат. Oxid Med Cell Longev. 2019; 2019: 9480945. doi: 10.1155/2019/9480945
5. Чен М, Динг Ю, Тонг З. Жаралуу колитти дарылоодо кытай чөптөрүнөн жасалган Sophora flavescens (Sophora flavescens) дарысынын эффективдүүлүгү жана коопсуздугу: клиникалык далилдер жана потенциалдуу механизмдер. Префармакология. 2020; 11:603476.doi:10.3389/fphar.2020.603476
6. Цао Фан, Лю Цзе, Ша Бенсин, Пан ХФ. Табигый продуктылар: сезгенүү ичеги ооруларын дарылоо үчүн эксперименталдык жактан натыйжалуу дары-дармектер. Curr Pharmaceuticals. 2019; 25: 4893–4913. doi: 10.2174/1381612825666191216154224
7. Чжан С, Цзян М, Лу А. Жаралуу колитти салттуу кытай медицинасы менен адъюванттык дарылоо боюнча ой жүгүртүүлөр. Клиникалык Rev Allergy Immunization. 2013;44:274–283.doi: 10.1007/s12016-012-8328-9
8. Ли Чжунтен, Ли Ли, Чен ТТ ж.б. Сезондук сасык тумоодон дарылоодо Банланген гранулдарынын эффективдүүлүгү жана коопсуздугу: рандомизацияланган көзөмөлдөнгөн сыноо үчүн изилдөө протоколу. trial.2015;16:126.doi: 10.1186/s13063-015-0645-x